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色谱柱的正确安装-第2章

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布器之后,才使TLC得到广泛地应用。在60年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱,出现了高效液相色谱(HPLC)。80年代初毛细管超临界流体色谱(SFC)得到发展,但在90年代后未得到较广泛的应用。而在80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳”(CZE),在90年代得到广泛的发展和应用。同时集HPLC和CZE优点的毛细管电色谱在90年代后期受到重视。到21世纪色谱科学将在生命科学等前沿科学领域发挥不可代替的重要作用。 
色谱法在分析化学中的地位和作用 
色谱分析法的特点是它具有高超的分离能力,而各种分析对象又大都是混合物,为了分析鉴定它们是由什么物质组成和含量是多少,必须进行分离,所以色谱法成为许多分析方法的先决条件和必需的步骤。从表5…1的数据可以看出色谱法在近年来各类分析化学方法中占在十分重要的地位。
1。2 色谱法的特点
色谱法是以其高超的分离能力为特点,它的分离效率远远高于其它分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。
(1)分离效率高。例如毛细管气相色谱柱(0。1~0。25μm i。 d.)30~50m其理论塔板数可以到 7万~12万。而毛细管电泳柱一般都有几十万理论塔板数的柱效,至于凝胶毛细管电泳柱可达上千万理论塔板数的柱效。
(2)应用范围广。它几乎可用于所有化合物的分离和测定,无论是有机物、无机物、低分子或高分子化合物,甚至有生物活性的生物大分子也可以进行分离和测定。
(3)分析速度快。一般在几分钟到几十分钟就可以完成一次复杂样品的分离和分析。近来的小内径(0。1mm i。 d.)、薄液膜(0。2μm)、短毛细管柱(1~10 m)比原来的方法提高速度5~10倍。
(4)样品用量少。用极少的样品就可以完成一次分离和测定。
(5)灵敏度高。例如GC可以分析几纳克的样品,FID可达10…2g/s,ECD达10…3g/s;检测限为10…9 g/L和10…12 g/L的浓度。
(6)分离和测定一次完成。可以和多种波谱分析仪器联用。
(7)易于自动化,可在工业流程中使用。

1。3 色谱法的分类
色谱法或色谱分析(chromatography)也称之为色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用混合物中各物质在两相间分配系数的差别,当溶质在两相间做相对移动时,各物质在两相间进行多次分配,从而使各组分得到分离。可完成这种分离的仪器即色谱仪。
色谱法的分类可按两相的状态及应用领域的不同分为两大类。
1。        按流动相分
        气相色谱 gas chromatography (GC) 
–        流动相是气体,固定相是固体吸收剂或液体(涂在固体上) 。
        液相色谱 liquid chromatography (LC) 
–        液体作为动流动相。 
2。        按分离机理分类
        吸附色谱法
        分配色谱法
        离子交换色谱法
        凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法
        亲和色谱法
3。        按固定相的外形/相系统的形式分类
        柱色谱: 
填充柱色谱:固定相装于柱内的色谱法。
毛细管色谱法:采用内壁涂渍极薄而均匀的固定液膜的毛细管作为色谱柱的气相色谱法。
        平板色谱: 固定相呈平板状的色谱法。 


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